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QPCR: ¿Ambos cebadores deben contener una pinza GC para que sean efectivos?

QPCR: ¿Ambos cebadores deben contener una pinza GC para que sean efectivos?


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Estoy desarrollando software que, entre otras cosas, diseña pares de cebadores (hacia adelante y hacia atrás) para qPCR. En mi investigación sobre varias propiedades, leí sobre las abrazaderas GC y creo que entiendo los conceptos básicos. Todavía hay algo que no me queda claro.

¿Es necesario que ambos cebadores de un par tengan una pinza GC para que sea eficaz? ¿O un GC-clamp, digamos que el cebador directo, solo aumenta la especificidad, y ambos cebadores que contienen una almeja la aumentan aún más?


Puede tener abrazaderas GC (terminal de 3 'G / C) en ambos cebadores; esto puede mejorar en general la eficacia de la PCR. Sin embargo, debe tener cuidado de no poner demasiadosG / Cs. Esto puede conducir a la estabilización de pares de cebadores, dando lugar a la formación de cebadores-dímeros. Vea también esta publicación: Al diseñar cebadores, ¿qué importancia tiene la pinza GC?

Las abrazaderas GC no siempre son esenciales y también debe tener en cuenta otros parámetros.


Ver el vídeo: The principle of Real Time PCR, Reverse Transcription, quantitative rt-PCR (Junio 2022).


Comentarios:

  1. Santos

    Veces me hace hacerlo.

  2. Durell

    Es una pena que no pueda participar en la discusión ahora. Muy poca información. Pero este tema me interesa mucho.

  3. Arian

    Creo que no tienes razón. Escríbeme por MP.

  4. Jorgen

    Creo que permitirás el error. Ofrezco discutirlo.



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